|
جزئیات محصول:
|
| نام محصول: | DNA لیگاز | 10299ES40: | 40000 U |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400000 U | 10299ES83: | 1,600,000 U |
| مول DNA ورودی (pmol): | DNA ورودی (ng)/ [0.66 × طول میانگین DNA ورودی (bp)] | کاربرد: | فقط برای استفاده تحقیقاتی! |
| برجسته: | 400 U/UL T4 DNA Ligase,تحقیق T4 DNA Ligase,T4 DNA Ligase معرف بیوشیمیایی |
||
Fast T4 DNA لیگاز (400 U/µL)
Fast T4 DNA Ligase یک محصول تک آنزیمی است که می تواند برای اتصال قطعات DNA و آداپتور در فرآیند ساخت کتابخانه NGS استفاده شود.این محصول با توالی توان بالا تأیید شده است و کیفیت عالی دارد.این آنزیم دارای قابلیت بستن بسیار کارآمد است که برای بستن قطعات پیچیده اسید نوکلئیک مانند آداپتور Ω پلت فرم MGI بسیار مناسب است.برای مشتریانی که نیازی به تنظیم سیستم ندارند، توصیه می شود ماژول بستن DNA Hieff NGSTM Ultima (Cat#12604) را که جزء اصلی آن Fast T4 DNA Ligase است، انتخاب کنید.
| نام محصول | گربه# | اندازه |
| Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) | 10299ES40 | 40000 U |
| 10299ES42 | 400000 U | |
| 10299ES83 |
1,600,000 U |
توضیحات محصول در موردT4 DNA لیگاز سریع
Fast T4 DNA Ligase یک محصول تک آنزیمی است که می تواند برای اتصال قطعات DNA و آداپتور در فرآیند ساخت کتابخانه NGS استفاده شود.این محصول با توالی توان بالا تأیید شده است و کیفیت عالی دارد.این آنزیم دارای قابلیت بستن بسیار کارآمد است که برای بستن قطعات پیچیده اسید نوکلئیک مانند آداپتور Ω پلت فرم MGI بسیار مناسب است.توصیه می شود Hieff NGS را انتخاب کنیدTMUltima DNA Ligation Module (Cat#12604) که جزء اصلی آن Fast T4 DNA Ligase برای مشتریانی است که نیازی به تنظیم سیستم ندارند.
جزء محصولاس ازT4 DNA لیگاز سریع
| شماره جزء | اجزاء | گربه#/اندازه | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-A | Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) | 100 میکرولیتر | 1 میلی لیتر | 4 میلی لیتر |
| 10299-B | بافر 10 × T4 DNA لیگاز | 250 میکرولیتر | 5 × 500 میکرولیتر | 10 میلی لیتر |
دستورالعمل ها
1. کیت های ساخت کتابخانه DNA جریان اصلی فعلی معمولاً پس از ترمیم نهایی و درمان A-Tailing خالص نمی شوند و مستقیماً بستن آداپتور را انجام می دهند.لطفاً به آماده سازی زیر برای سیستم واکنش مراجعه کنید.کاملاً گرداب کنید، مختصری بچرخانید و به مدت 15 دقیقه در دمای 20 درجه سانتیگراد انکوبه کنید.
| اجزاء | حجم (μL) |
| DNA دنباله دار dA | 60 |
| بافر 10 × T4 DNA لیگاز | 10 |
| 50% PEG 6000 | 10* |
| آداپتور DNA | ایکس** |
| Fast T4 DNA Ligase (400 U/µL) | 1-5*** |
| ddH2O | تا 100 |
[توجه داشته باشید]:*50% PEG 6000 در کیت موجود نیست، باید خودتان آن را تهیه کنید.
**برای مقدار آداپتور به جدول زیر مراجعه کنید.
***مقدارسریعT4 DNA Ligase مورد استفاده را می توان 1-5 میکرولیتر در صورت نیاز اضافه کرد.
2. کیفیت و غلظت آداپتورهای مورد استفاده مستقیماً بر راندمان بستن و بازده کتابخانه تأثیر می گذارد.استفاده بیش از حد از آداپتور ممکن است دایمرهای آداپتور بیشتری تولید کند، در حالی که استفاده کمتر ممکن است بر راندمان بستن و بازده کتابخانه تأثیر بگذارد.جدول زیر مقدار توصیه شده آداپتور مورد استفاده در موقعیت های مختلف DNA ورودی با استفاده از این کیت را فهرست می کند.
| DNA ورودی |
آداپتور: DNA ورودی (نسبت مولی) |
DNA ورودی |
آداپتور: DNA ورودی (نسبت مولی) |
| 1 میکروگرم | 10:1 | 50 نانوگرم | 100:1 |
| 500 نانوگرم | 20:1 | 25 نانوگرم | 200:1 |
| 250 نانوگرم | 40:1 | 1 نانوگرم | 200:1 |
| 100 نانوگرم | 100:1 | 500 صفحه | 400:1 |
[توجه]: مول DNA ورودی (pmol)≈ DNA ورودی (ng)/ [0.66 × DNA ورودی طول متوسط (bp)].
مرحله 1: تعداد مول های DNA ورودی را محاسبه کنید.فرمول: مول DNA ورودی (pmol)≈ DNA ورودی (ng)/ [0.66 × DNA ورودی طول متوسط (bp)]؛مول DNA ورودی (pmol) = 100 ÷ (0.66×300) = 0.5 pmol.
گام 2: با توجه به جدول بالا تعداد مول های آداپتور اضافه شده را محاسبه کنید.وقتی DNA ورودی 100ng است، نسبت مولی آداپتورها: DNA ورودی 100:1 است و تعداد مول آداپتورهای اضافه شده = 100×0.5 pmol = 50 pmol.
مرحله 3: حجم اضافه آداپتور را محاسبه کنید.غلظت آداپتور = 15 میکرومول در لیتر (اگر از آداپتور شرکت دیگری استفاده می کنید، باید غلظت آن را طبق دستورالعمل آن تعیین کنید).حجم آداپتور اضافه شده = مول آداپتور اضافه شده (50 pmol) ÷ غلظت آداپتور (15 میکرومول در لیتر) = 3.34 میکرولیتر (توجه: 15 μmol/L = 15 pmol/μL).
به طور خلاصه، حجمی که آداپتور را می توان به آن اضافه کرد 3.4 میکرولیتر است.(توجه: حداکثر حجم اضافه آداپتور از 5 میکرولیتر تجاوز نمی کند).
تعریف واحد
در یک سیستم واکنش بستن 20 میکرولیتری، زمانی که 6 میکروگرم λDNA-Hind Ⅲ در دمای 16 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه واکنش نشان داد، مقدار آنزیم مورد نیاز برای بستن بیش از 50 درصد قطعات DNA به عنوان یک واحد (U) تعریف شد.
هشدارها
1. T4 DNA Ligase به دناتوره شدن فیزیکی حساس است.هنگام مخلوط کردن، لوله را به آرامی برعکس کنید و خوب تکان دهید.به شدت تکان نخورید؛
2. آنزیم ها باید در جعبه یخ یا حمام یخ در هنگام استفاده نگهداری شوند و بلافاصله پس از استفاده باید در دمای -20 درجه سانتیگراد نگهداری شوند.
3.این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی است!
4.برای ایمنی و سلامتی خود، لطفاً برای عملیات از کت آزمایشگاه و دستکش یکبار مصرف استفاده کنید.
اگر به اطلاعات بیشتری در مورد این Fast T4 DNA لیگاز (400 U/μL) نیاز دارید، لطفاً با ما تماس بگیرید، با تشکر
تماس با شخص: Ms Kris
تلفن: +8613049739311
